Analyse séminale
L'analyse du sperme est une étape initiale dans l'investigation de l'infertilité masculine pour comprendre la présence ou l'absence de spermatozoïdes, leur mobilité et leur forme (morphologie).
Il est important de souligner que l'analyse du sperme ne permet pas de déterminer la fertilité d'un homme. Pour une évaluation plus approfondie, des tests de la fonction spermatique doivent être réalisés. L'étude des caractéristiques du sperme est un indicateur de la fonction testiculaire et, de ce fait, est importante pour évaluer la santé globale d'un homme.
COMMENT LE TEST EST EFFECTUÉ
L'analyse du sperme doit être réalisée avec soin, car elle fournit des informations importantes sur la spermatogenèse et la perméabilité des voies génitales. Traditionnellement, le diagnostic d'infertilité masculine repose sur une évaluation descriptive des paramètres de l'éjaculat, notamment la concentration, la mobilité et la morphologie des spermatozoïdes. Le principe fondamental de cette approche est que la fertilité masculine peut être définie par un nombre minimal de spermatozoïdes morphologiquement normaux et à mobilité progressive, seuil qui doit être atteint pour qu'un individu soit considéré comme ayant une spermatogenèse normale et des chances de grossesse plus élevées.
ÉTAPE 1 : PRÉLÈVEMENT DES ÉCHANTILLONS
L’Organisation mondiale de la santé recommande que les prélèvements soient effectués par auto-masturbation dans une pièce adjacente au laboratoire afin d’éviter toute interférence extérieure sur les résultats. Dans des cas exceptionnels, notamment pour les patients hospitalisés, Androscience propose un service validé par les autorités sanitaires assurant le transport des prélèvements biologiques de l’hôpital au laboratoire.
Le jour du prélèvement, l'homme doit s'abstenir d'éjaculer pendant 2 à 7 jours (durée suggérée par l'OMS) ou selon les directives d'un médecin.
Nous disposons d'une salle de prélèvement qui garantit le confort et l'intimité de l'homme, avec toutes les ressources nécessaires pour que le prélèvement se déroule de manière privée et sécurisée.
ÉTAPE 2 : LIQUÉFACTION DE L'ÉCHANTILLON ET ANALYSE MACROSCOPIQUE
A análise seminal inicia-se com a avaliação macroscópica. É analisado seguindo as recomendações do manual da OMS de 2021, os seguintes parâmetros:
Coagulação e Liquefação do sêmen
Imediatamente após a ejaculação no recipiente de coleta, o sêmen se apresenta na forma de uma massa coagulada semissólida, em razão da presença de proteínas secretadas pelas vesículas seminais. Minutos após, esse coágulo começa se liquefazer. A liquefação do coágulo seminal é um processo enzimático e a principal enzima envolvida é o antígeno prostático específico (PSA).
Amostras normalmente liquefeitas podem conter corpúsculos gelatinosos que não se dissolvem; estes não apresentam nenhum significado clínico. O tempo médio para a liquefação completa é de 15 a 30 minutos. Caso ela não ocorra em até 60 minutos, classifica-se a liquefação como “incompleta” e pode indicar alguma disfunção na próstata.
Volume seminal
O valor do volume de sêmen estabelecimento como referência é ≥ a 1,4 mL. Baixo volume pode indicar obstrução do ducto ejaculatório, ausência congênita bilateral do ducto deferente, ejaculação retrógrada parcial, entre outros, ao passo que um alto volume de sêmen pode refletir exsudação ativa em casos de inflamação das glândulas acessórias. Outros fatores, como perda de parte da amostra durante a coleta, período de abstinência inadequado e estresse, também podem diminuir o volume do ejaculado colhido.
Aparência/ cor:
A cor considerada normal do sêmen é branco-opalescente. Alterações na cor podem indicar doenças locais ou sistêmicas (infecção, hepatite) ou ainda uso de certos medicamentos.
Sêmen amarelado: a presença de infecções ou uso de determinados medicamentos pode alterar a cor do sêmen para amarelo. Períodos prolongados de abstinência podem deixá-lo ligeiramente amarelado também.
Sêmen avermelhado: condição conhecida por hematospermia, onde há presença de hemácias no sêmen. Pode ser resultado de processo inflamatório, obstrução ou cistos nos dutos ejaculatórios, neoplasias, anormalidades vasculares, entre outros.
Translúcido: o sêmen pode parecer mais “transparente” se a concentração de espermatozoides for baixa.
Viscosidade
O aumento da viscosidade do sêmen pode estar relacionado com alguma disfunção na próstata ou vesículas seminais. A consistência anormal também pode prejudicar a avaliação das outras características do sêmen, como motilidade, concentração ou determinação de anticorpos anti-espermatozoides.
pH:
O pH seminal é resultado da mistura das secreções das vesículas seminais (pH alcalino) e da próstata (pH ácido). O valor normal do pH seminal é ≥ 7,2. Em casos onde o pH <7,2 em amostras com baixo volume e baixo número de espermatozoides, há suspeita de obstrução do ducto ejaculatório ou ausência bilateral congênita do ducto deferente (vesículas seminais pouco desenvolvidas).
Odor:
A OMS acrescentou no manual de 2021 o parâmetro odor. Deve ser relatado no laudo se o odor do sêmen estiver pútrido.
ÉTAPE 3 : ANALYSE MICROSCOPIQUE
Finalizada a avaliação macroscópica, começa-se a avaliação microscópica que inclui a análise dos parâmetros:
-
Concentração de espermatozoides por mL;
-
Número total de espermatozoides;
-
Motilidade;
-
Morfologia;
-
Presença ou ausência de agregação e aglutinação;
-
Vitalidade;
-
Contagem de células redondas (leucócitos e células germinativas imaturas,
-
espermatócitos secundários, espermátides).
Concentração:
É a estimativa da quantidade de espermatozoides em milhões no líquido seminal por mL de sêmen.
Número total de espermatozoide:
É a estimativa da quantidade de espermatozoides em milhões em todo o ejaculado.
Motilidade espermática:
A presença e a qualidade da motilidade dos espermatozoides são um fator importante. Somente espermatozoides que nadam ativamente são capazes de penetrar o muco cervical, migrar pelo sistema reprodutor feminino, penetrar o óvulo e realizar a fertilização. Os espermatozoides são classificados, de acordo com a motilidade, em:
·Grau A: espermatozoides rápidos progressivos;
-
Grau B: espermatozoides lentos progressivos;
-
Grau C: espermatozoides não-progressivos: todos os outros padrões de movimento de cauda com ausência de progressão, p. ex: espermatozoides nadando em pequenos círculos;
-
Grau D: espermatozoides imóveis.
Vitalidade:
Quando uma amostra apresenta grande quantidade de espermatozoides imóveis (motilidade total <40%), torna-se necessário verificar se os espermatozoides estão vivos ou mortos. Para isso existem os testes de vitalidade.
Esses testes se baseiam na observação da integridade da membrana plasmática dos espermatozoides. No Androscience, realizamos o teste de vitalidade por dois métodos: inchaço hiposmótico (HOS) e eosina-nigrosina.
Agregação e aglutinação:
Quando há presença de espermatozoides imóveis aderidos uns aos outros ou espermatozoides móveis aderidos a cordões de muco ou outras células, chamamos de agregação não específica.
Já quando há presença de espermatozoides móveis aderidos uns aos outros, chamamos de aglutinação e sugere presença de anticorpos anti-espermatozoides.
Há 4 graus de aglutinação:
-
Grau 1: isolado <10 espermatozoides por aglutinado, muitos livres;
-
Grau 2: moderado 10–50 espermatozoides por aglutinado, livres;
-
Grau 3: grandes aglutinados de >50 espermatozoides, alguns ainda livres;
-
Grau 4: todos os espermatozoides aglutinados e grupos de espermatozoides aglutinados interligados.
Células redondas:
O sêmen também apresenta outros elementos celulares sem ser os espermatozoides, como espermatócitos e espermátides (células precursoras dos espermatozoides) e leucócitos (células de defesa). É importante diferenciar os leucócitos das células precursoras dos espermatozoides, ambas bastante semelhantes e denominadas células redondas. Para diferenciar as células redondas é necessário realizar um teste de pesquisa de leucócitos.
ÉTAPE 4 : MORPHOLOGIE DES SPERMATOZOÏDES
La morphologie des spermatozoïdes analyse leur forme et est considérée comme un paramètre de leur qualité. La tête, le col, la pièce intermédiaire et le flagelle sont évalués.
Critères de classification morphologique :
Morphologie des spermatozoïdes selon les critères de l'Organisation mondiale de la santé : les spermatozoïdes humains sont évalués au microscope optique après coloration spéciale. Selon ce système, ils sont classés comme normaux (ovales), amorphes, bicéphales, mégalocéphales, coniques, présentant des anomalies de la pièce intermédiaire ou du flagelle, etc. Ce système tolère des irrégularités mineures. C'est un critère moins rigoureux, mais non moins important. Il peut contribuer à identifier des anomalies de la spermatogenèse, caractéristiques de certaines maladies.
Morphologie des spermatozoïdes selon les critères stricts de Kruger : ce critère de classification rigoureux repose sur l’analyse de 200 spermatozoïdes. Ceux potentiellement normaux sont mesurés à l’aide d’une règle (micromètre) intégrée au microscope. Plusieurs mesures sont effectuées sur chaque spermatozoïde, qui est ensuite classé comme normal (ovale) ou anormal.
COMPRENDRE L'ANALYSE DES SÉMINAIRES
Bien qu'il puisse sembler s'agir d'un test simple et facile à réaliser, l'analyse du sperme englobe une série complexe d'évaluations des paramètres spermatiques, avec des résultats très variables qui peuvent être interprétés de différentes manières.
L'analyse du sperme est couramment utilisée pour évaluer le potentiel reproducteur masculin et comme guide pour les médecins dans la prise en charge des couples infertiles. Au cours des 40 dernières années, l'Organisation mondiale de la Santé (OMS) a standardisé la méthodologie d'examen du sperme afin d'uniformiser et de rendre plus pertinent ce test.
Concernant le sperme, de nouvelles valeurs de référence ont été établies en 2021 grâce à de nombreuses études portant sur des milliers d'échantillons provenant d'hommes d'origines ethniques diverses ayant obtenu une grossesse dans les 12 mois suivants. L'objectif de ces valeurs de référence est non seulement de permettre une interprétation correcte des résultats et de classer l'échantillon comme « normal » ou « anormal », mais aussi de situer les paramètres spermatiques dans une catégorie (ou percentile) et d'estimer les chances de grossesse sur une période de 12 mois, guidant ainsi le médecin vers un diagnostic et un traitement précis. Il est important de souligner que les résultats d'une analyse de sperme doivent toujours être interprétés conjointement avec ceux des tests de fonction spermatique et des autres examens prescrits par le médecin.
Le tableau ci-dessous présente les valeurs minimales estimées pour obtenir une grossesse à ≤ 12 mois, selon des études menées par l'OMS en 2021.
La colonne bleue indique le 5e percentile et correspond aux valeurs minimales qu'un homme doit présenter pour avoir une faible probabilité de conception. Autrement dit, parmi la population fertile étudiée, 5 % présentent ces valeurs dans leurs paramètres spermatiques et ont malgré tout réussi à féconder leur partenaire dans l'année. On peut également interpréter ce résultat comme suit : 95 % des hommes ayant participé à l'étude avaient un sperme dont les paramètres étaient supérieurs au 5e percentile.
Bien qu'un homme dont les paramètres spermatiques se situent dans le 97,5e percentile ait plus de chances de concevoir un enfant, il peut néanmoins ne pas y parvenir, car la fertilité dépend également de la capacité fonctionnelle des spermatozoïdes et de nombreux autres facteurs cliniques, y compris des facteurs féminins.
La colonne bleue indique le 5e percentile et correspond aux valeurs minimales qu'un homme doit présenter pour avoir une faible probabilité de conception. Autrement dit, parmi la population fertile étudiée, 5 % présentent ces valeurs dans leurs paramètres spermatiques et ont malgré tout réussi à féconder leur partenaire dans l'année. On peut également interpréter ce résultat comme suit : 95 % des hommes ayant participé à l'étude avaient un sperme dont les paramètres étaient supérieurs au 5e percentile.
Bien qu'un homme dont les paramètres spermatiques se situent dans le 97,5e percentile ait plus de chances de concevoir un enfant, il peut néanmoins ne pas y parvenir, car la fertilité dépend également de la capacité fonctionnelle des spermatozoïdes et de nombreux autres facteurs cliniques, y compris des facteurs féminins.
Références bibliographiques :
Manuel de laboratoire de l'OMS pour l'examen et le traitement du sperme humain, sixième édition, Genève : Organisation mondiale de la santé, 2021.
Kruger TF, Menkveld R, Stander FS, Lombard CJ, Van der Merwe JP, van Zyl JA, Smith K. Les caractéristiques morphologiques des spermatozoïdes comme facteur pronostique dans la fécondation in vitro. Fertile Sterile. 1986;46(6):1118-23.